由(you)于在纽约自然历史博(bo)物馆担任警卫有出(chu)色表现，拉瑞（本(ben)·斯(si)蒂勒 Ben Stiller 饰）出任某(mou)家(jia)电小公司(si)的CEO，而且还在电视(shi)上接受(shou)了著名(ming)脱口(kou)秀主(zhu)持人的访谈，儿子对他(ta)仰慕，爱情如影(ying)随形(xing)，一派(pai)春风得意(yi)的样子(zi)。不过，好(hao)景不(bu)长(zhang)，当(dang)他故地重游，却意外(wai)发(fa)现馆长(zhang)已(yi)经(jing)因为更新展览(lan)并准备(bei)把过时的展品(pin)挪(nuo)到华(hua)盛顿的史密森博物馆继续展出。这让拉瑞感到有些气愤，他觉得(de)自(zi)己有责(ze)任重振(zhen)博物(wu)馆之雄风，于是他决定留下来(lai)再做(zuo)一晚警卫，以唤起(qi)那些老(lao)朋友的共(gong)同努力。事实(shi)上，在搞定了罗斯福（罗宾·威廉斯 Robin Williams 饰）、林肯(ken)、拿破仑、伊凡雷帝和阿尔•卡(ka)邦(bang)等人之(zhi)后(hou)，他遭遇了一个劲敌——邪恶的(de)古埃(ai)及法老的卡门拉，二人在夜晚再度(du)上演了(le)博物馆的惊(jing)魂对决……